ELISA với kết quả xấu?Hãy theo dõi chúng tôi để chọn đúng tấm Elisa.
Chọn một đĩa ELISA phù hợp là bước đầu tiên để thí nghiệm ELISA thành công, nhưng nhiều người bỏ qua điều này. Mọi người khi làm thí nghiệm thường chỉ xem xét bản thân thí nghiệm mà không biết rằng sản phẩm thường có tác động rất lớn đến thí nghiệm. Việc lựa chọn sản phẩm phù hợp sẽ góp phần vào thành công của thí nghiệm. Chúng tôi thường xem xét các yếu tố sau khi tiến hành các thí nghiệm ELISA:
1. hình dạng của đáy
Hiện nay, các nhà sản xuất thiết kế các giếng được dán nhãn enzyme thành các cột độc lập và tăng khoảng cách giữa các giếng một cách thích hợp để chúng có thể được tách ra một cách độc lập, do đó giảm thiểu sự nhiễm bẩn chéo. Các loại đĩa Elisa khác nhau có hình dạng đáy giếng khác nhau. Dưới đây là một số hình dạng đáy lỗ phổ biến:
Đáy phẳng: Đáy nằm ngang, còn gọi là đáy F. Ánh sáng sẽ không bị lệch qua đáy, có thể truyền ánh sáng ở mức độ lớn nhất. Sử dụng cho các thử nghiệm yêu cầu đáy tròn vì khả năng hiển thị hoặc các lý do khác.
Đáy tròn: Còn được gọi là Đáy chữ U, mang lại kết quả làm sạch và hiệu suất lai tốt nhất, thích hợp cho các ứng dụng cần kiểm tra cặn.
Đáy chữ C: Nó có thể mang lại hiệu quả làm sạch tốt giữa đáy phẳng và đáy tròn, đồng thời kết hợp những ưu điểm của đáy phẳng.
Đáy hình nón: Còn được gọi là đáy chữ V, nó thích hợp để lấy mẫu chính xác và lưu trữ các mẫu vi mô để thu hồi tối ưu các thể tích nhỏ.
2. Màu sắc của tấm Elisa
Tấm Elisa có ba màu: trong suốt, đen và trắng.
Đa số ELISA chọn đĩa trong suốt làm vật liệu thí nghiệm. Các tấm Elisa trắng và đen thường được sử dụng để phát hiện sự phát quang. Bản thân tấm ELISA đen hấp thụ ánh sáng, do đó tín hiệu của nó yếu hơn so với tấm ELISA trắng. Tấm Elisa đen thường được sử dụng để phát hiện ánh sáng mạnh hơn, chẳng hạn như phát hiện huỳnh quang; ngược lại, các tấm Elisa trắng có thể được sử dụng để phát hiện ánh sáng yếu hơn, và thường được sử dụng để phát quang hóa học nói chung và phát triển màu nền (chẳng hạn như luciferase kép). phóng viên phân tích gen).
3. Chất liệu của tấm Elisa
Vật liệu phổ biến là polyethylene (PE), polypropylene (PP), polystyrene (PS), polyvinyl clorua (PVC) và polycarbonate (PC).
Các vật liệu được sử dụng rộng rãi nhất trong ELSIA là polystyrene và polyvinyl clorua. Tấm mềm polyvinyl clorua mỏng, có thể cắt được và giá thành rẻ. Nhược điểm là độ hoàn thiện không tốt bằng ván polystyrene, đáy lỗ không bằng phẳng như polystyrene. Nhưng giá trị nền tương ứng cũng sẽ tăng lên. Thông thường, xử lý ghép ion được thực hiện trên bề mặt của tấm ELISA, và các nhóm chức hoạt động như nhóm aldehyde, nhóm amin và nhóm epoxy được đưa vào bề mặt polyme để cải thiện hiệu suất của bề mặt nền.
4. các cơ chế ràng buộc khác nhau
Liên kết hiệu quả của vật liệu phủ với bề mặt dưới cùng của tấm là một bước quan trọng trong ELISA. Vì vậy, các đặc điểm cấu tạo và tính chất hóa học của chất cần tráng cần được phân tích kỹ lưỡng trước khi thí nghiệm để lựa chọn một tấm Elisa thích hợp. Nói chung, có một số cách liên kết vật liệu phủ với đáy tấm: hấp phụ thụ động, liên kết cộng hóa trị và bắt giữ ái lực.
Hấp phụ thụ động: Cơ chế của hấp phụ thụ động rất phức tạp và liên kết giữa vật liệu phủ và đáy tấm chủ yếu dựa vào lực liên phân tử (lực van der Waals) và liên kết hydro. Trong hầu hết các ELISA, sự liên kết của chất phủ với đáy tấm được thực hiện bằng cách hấp phụ thụ động. Nói chung, sự gắn kết giữa các kháng nguyên (hoặc kháng thể) có trọng lượng phân tử trung bình và lớn và đáy đĩa được thực hiện bằng cách hấp phụ thụ động. Các đặc tính kỵ nước / ưa nước của bề mặt đáy của tấm thường được xem xét khi lựa chọn tấm Elisa. Bảng sau liệt kê phạm vi ứng dụng và sử dụng của các bề mặt nền ưa nước khác nhau:
ưa nước | Ràng buộc ưu tiên | Cách sử dụng chính |
- | Các phân tử có chứa các vùng kỵ nước đáng kể, chẳng hạn như: lipid, lipoprotein, protein lớn | Kháng nguyên ELISA, FlA, LIA |
thêm | Các phân tử sinh học có đặc tính ưa nước / kỵ nước như: protein trung bình đến lớn, globulin miễn dịch, albumin | Double Antibody Sandwich ELISA, Antigen ELISA |
cộng thêm | Các phân tử sinh học có đặc tính ưa nước / kỵ nước như: protein từ nhỏ đến lớn, immunoglobulin, albumin, LPS, protein phosphoryl hóa, glycoprotein | Kháng thể kép ELISA, FIA, LIA |
cộng với cộng cộng | Glycoprotein, phân tử lipid phân cực, phospholipid, cardiolipid | Kháng nguyên ELISA |
Sự bắt giữ ái lực: Sự bắt giữ ái lực dựa trên sự liên kết cụ thể của các đại phân tử được gắn nhãn với các thụ thể tương ứng của chúng. Các đại phân tử được gắn thẻ có thể thu được bằng cách ghép nối hóa học hoặc bằng kỹ thuật di truyền.
Các tính năng của Nắm bắt sở thích là:
1. tính cụ thể cao
2.Có thể cải thiện tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu của kết quả đo
Các bề mặt đáy giếng phổ biến hơn là: bề mặt phủ streptavidin (streptavidin); bề mặt phủ niken chelate (Nickel Chelate) và bề mặt phủ glutathione (Glutathione, GSH).
3. Bề mặt Streptavidin: Tính đặc hiệu và ái lực cao của streptavidin và biotin được sử dụng để nhận ra sự liên kết của tấm đáy với protein bao phủ.
4. Bề mặt chelate niken: Niken chelate được gắn vào bề mặt polyme để liên kết các protein dung hợp với các thẻ His (histidine).
5. Bề mặt glutathione: Sử dụng tính đặc hiệu của enzyme và chất nền giữa glutathione và glutathione sulfhydryltransferase (GST) để đạt được sự liên kết của tấm đáy với protein áo.
Tại sao chọn tấm BKMAM Elisa?
Được làm bằng 100% vật liệu polystyrene,
Thích hợp cho nuôi cấy tế bào kết dính,
Đế phẳng, độ dày đều và kích thước đồng nhất cho các cực phản ứng,
Vô trùng với từng gói riêng lẻ,
Chất lượng cao với giá xuất xưởng.
