Những bạn làm thí nghiệm liên quan đến tế bào thường phải sử dụng phương pháp đóng băng tế bào. Nói tóm lại, bảo quản đông lạnh tế bào là bảo quản tế bào trong môi trường nhiệt độ thấp nhằm đạt được mục đích bảo quản lâu dài. Các tế bào sẽ có một mức độ đột biến nhất định trong quá trình truyền tải. Để đảm bảo rằng các tế bào vẫn có thể được sử dụng trong trường hợp tế bào bị ô nhiễm và đột biến, một số tế bào thường được sử dụng để đông lạnh.
Nguyên lý đông lạnh tế bào
Một nguyên tắc trong quá trình đông lạnh và phục hồi tế bào là “dung hợp đông lạnh chậm” nhằm tiết kiệm tối đa sức sống của tế bào. Nói một cách đơn giản, nó cần được làm chậm khi đông lạnh và làm mát, và nó cần được làm nóng nhanh chóng khi phục hồi từ nhiệt độ thấp. Lý do đông lạnh chậm là nếu các tế bào được đặt trực tiếp trong môi trường nhiệt độ cực thấp như nitơ lỏng, các tế bào sẽ tạo thành một tinh thể băng lớn, sẽ làm hỏng tế bào.
Nếu bạn đóng băng nó từ từ, các tế bào có thể bị mất nước từ từ để đạt được mục đích bảo vệ tế bào. Ngoài ra, khi khôi phục, cũng là để ngăn chặn các tinh thể băng nhỏ hình thành các tinh thể băng lớn, tức là các tinh thể băng nặng. Do đó, khi mọi người thường tiến hành đông lạnh tế bào, điều đó luôn khiến tế bào bị hao hụt, điều này có thể ảnh hưởng đến bước đông lạnh.
Một số phương pháp đông lạnh tế bào
Phương pháp thủ công: Đông lạnh tế bào thường được bảo quản trong nitơ lỏng. Phương pháp vận hành thủ công là làm mát gradient trong tủ lạnh. Lưu các tế bào trong ống bảo quản đông lạnh và đặt chúng vào môi trường tủ lạnh 4 độ C, -20 độ C, -80 độ C theo thứ tự. Đông lạnh trong 24 giờ ở -80 độ C trước khi chuyển sang nitơ lỏng. Làm mát thủ công không yêu cầu bổ sung thêm các vật tư tiêu hao khác. Nó có thể được vận hành bằng tay. Nó là đơn giản nhất, nhưng nó không đơn giản. Các hoạt động thực tế là rắc rối. Và hiệu quả không tốt lắm, vì phương pháp làm mát này vẫn chưa đồng đều và không nhất thiết phải áp dụng cho các tế bào mỏng manh hơn.
Hộp làm mát gradient : Hộp làm mát gradient được bán trên thị trường được sử dụng đặc biệt trong quá trình làm mát đồng đều của quá trình cấp đông. Tốc độ làm mát thường là -1 độ/phút. Đặt ống bảo quản đông lạnh vào hộp làm mát chuyển màu và đặt hộp làm mát chuyển màu trực tiếp vào môi trường tủ lạnh -80 độ C để qua đêm mà không cần vận hành chuyển màu thủ công. Sau đó hạ thấp ống lưu ký và đặt nó vào nitơ lỏng. Hiệu quả của việc sử dụng các hộp làm mát gradient sẽ tốt hơn, bởi vì các hộp làm mát thương mại trên thị trường có thể đảm bảo tốc độ làm mát gần như đồng đều.
Có hai hộp làm mát gradient phổ biến trên thị trường. Cần thêm isopropyl, thường là thân hộp PC. Khi sử dụng thêm isopenol vào vạch chia tỷ lệ trong hộp khi sử dụng. Isopropanol được sử dụng làm chất mang để lưu trữ và phân phối nhiệt.
Một loại khác không cần thêm isopropyl, tạo bọt và có thể đặt tủ đông trực tiếp trong quá trình sử dụng, thuận tiện hơn khi vận hành.
Hộp làm mát isopropanol được khuyến nghị thay thế chất lỏng sau khi sử dụng nhiều lần, nhưng vì isopropanol là chất lỏng độc hại, gây hại cho các thí nghiệm và môi trường nên thường có thể sử dụng nhiều lần. Tuy nhiên, cần đảm bảo chất lỏng ở một lượng nhất định.
Bảo quản đông lạnh không lập trình: Sử dụng chất lỏng đông lạnh không lập trình có thể mua được trên thị trường. So với chất lỏng đông lạnh truyền thống, thành phần bên trong có thể làm giảm thiệt hại cho các tế bào của tinh thể băng, do đó không cần sử dụng gradient để làm mát, cũng như không cần hộp làm mát gradient. Kho đông lạnh có thể được đặt trực tiếp trong môi trường tủ lạnh -80 độ C.
Nhiều mẫu ô rất quý. Ngoài ta phải vận dụng khi làm thí nghiệm. Bạn cũng cần chọn sản phẩm tốt càng nhiều càng tốt trong việc lựa chọn sản phẩm liên quan. Chọn ống lưu trữ đông lạnh có chất lượng đủ tiêu chuẩn, cố gắng sử dụng công cụ làm mát gradient để cấp đông và tối đa hóa việc đảm bảo các tế bào bị hư hại thấp để tránh tổn thất nhỏ do nhỏ.
